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如何操作四元低壓液相色譜儀

更新時間:2024-11-27   點擊次數:516次
  四元低壓液相色譜儀是一種精密的分析儀器,廣泛應用于化學、生物、醫藥等領域。正確操作對于保證實驗結果的準確性和儀器的使用壽命至關重要。
  一、開機前準備
  1.1流動相準備
  根據實驗需求,選擇并配制好所需的流動相。流動相需經過過濾和超聲脫氣處理,一般使用0.22μm或0.45μm孔徑的濾膜過濾,并超聲脫氣10-20分鐘。注意,水相中的無機鹽和表面活性劑等固體溶質應采用加熱法溶解,避免振搖或超聲處理可能導致的溶質析出。
  1.2儀器檢查
  檢查液相色譜儀的各個部件是否連接緊密,無泄漏。確認色譜柱安裝正確,流動相瓶中的流動相充足。
  二、開機操作
  2.1打開電源
  首先,打開液相色譜儀的總電源,然后依次打開各個組件的電源,如泵、檢測器等。同時,打開計算機和液相色譜工作站軟件。
  2.2沖洗系統
  用純甲醇或其他適宜的溶劑沖洗系統10-20分鐘,以清洗管路和色譜柱中的雜質。如果流動相為含鹽流動相,需先用水沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動相。
  2.3設置參數
  在液相色譜工作站上設置所需的檢測波長、流速、柱溫、壓力上下限等參數。一般情況下,流速設置為1ml/min,柱溫保持在30℃-35℃之間。
  三、流動相置換與排氣泡
  3.1置換流動相
  按照實驗要求,將配制好的流動相分別裝入各自的流動相瓶中。在液相色譜工作站上設置各泵的流動相比例和流速,開始置換流動相。
  3.2排氣泡
  通過調整泵的流速和比例,使流動相在管路中循環,排出管路中的氣泡。具體操作步驟包括設置壓力下限為0MPa,打開排空閥,分別將各流動相通道的比例設置為100%,流速調至5ml/min進行沖洗,直至管路中無氣泡為止。
  四、平衡色譜柱
  將流動相的比例調整至實驗所需的比例,繼續以1ml/min的流速沖洗色譜柱,直至基線穩定。基線穩定是判斷色譜柱平衡的重要標志,一般需要20-30分鐘。
  五、進樣分析
  5.1樣品處理
  在色譜柱平衡期間,進行樣品的預處理,如過濾、稀釋等。確保樣品符合進樣要求。
  5.2進樣操作
  打開自動進樣器或手動進樣器,根據實驗需求設置進樣量、進樣速度等參數。進樣前,用洗針液清洗進樣針,排除針筒中的氣泡。進樣時,確保進樣針準確插入樣品瓶中,并快速注入樣品。
  5.3數據采集與處理
  在液相色譜工作站上設置數據采集參數,開始采集數據。待樣品分析完成后,對數據進行積分計算,并出具報告。
  六、關機操作
  6.1清洗管路
  實驗結束后,先用水或低濃度甲醇水溶液沖洗整個管路30分鐘以上,再用甲醇沖洗,以清洗管路中殘留的樣品和流動相。
  6.2關閉儀器
  依次關閉泵、檢測器等組件電源,然后關閉計算機和液相色譜工作站軟件。最后關閉總電源。
  七、注意事項
  1.流動相選擇:確保流動相均為色譜純度,避免使用含有雜質或顆粒的流動相。
  2.壓力控制:使用過程中要注意觀察壓力變化,避免壓力過高或過低對儀器和色譜柱造成損害。
  3.氣泡排除:排氣泡時要確保管路中無氣泡殘留,否則會影響分析結果的準確性。
  4.樣品處理:樣品需經過適當的預處理后才能進樣分析,避免對儀器和色譜柱造成污染。
  5.定期維護:定期對液相色譜儀進行維護和保養,如更換色譜柱、清洗過濾頭等,以保證儀器的正常使用和延長使用壽命。
  通過以上步驟和注意事項的詳細闡述,相信您已經掌握了如何操作四元低壓液相色譜儀的方法。在實際操作中,請務必遵循操作規程和安全規范,確保實驗結果的準確性和人身安全。
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